Video: Geometria molecolare: la teoria VSEPR 2025
Che cosa rendono i tamponi di fosfati spiccano? Innanzitutto, perché contiene tre protoni acidi, l'acido fosforico ha più costanti di dissociazione e può essere utilizzato per creare buffer per uno dei tre pH corrispondenti.
I tre valori pKa per l'acido fosforico (dal CRC Handbook of Chemistry e Physics) sono 2. 16, 7. 21 e 12. 32. Il solfato monosodico e la sua base coniugata, fosfato di sodio sono solitamente usati per generare buffer di pH valori intorno ai 7, per applicazioni biologiche, come mostrato qui.
Fare questo buffer è un po 'più difficile che fare buffer di TAE e TBE. Tuttavia, non è estremamente difficile. Semplicemente media. Dovrebbe impiegare circa 10 minuti per saltare su questo buffer. Ecco come.
1. Decidere sulle proprietà del buffer
Prima di fare un buffer, prima di sapere qual è la molarità che vuoi, qual è il volume da fare e quale sia il pH desiderato. La maggior parte dei tamponi funziona meglio a concentrazioni tra 0,1 M e 10 M. Il pH dovrebbe essere all'interno di un pH unitario della base pKa di acido / coniugato. Per semplicità, questo calcolo del campione sarà per 1 litro di buffer.
2. Determinare la relazione dell'acido alla base
Utilizzare l'equazione di Henderson-Hasselbalch (qui di seguito) per determinare quale rapporto acido-base è necessario per fare un tampone del pH desiderato. Utilizzare il valore pKa più vicino al pH desiderato e il rapporto si riferirà alla coppia di coniugi acido-base che corrisponde a quella pKa.
Equazione di HH: pH = pKa + log ([Base] / [Acido])
Per un tampone di pH 6,9, [Base] / [Acido] = 0. 4898
Sostituire per [Acido] e Risolvere per [Base]
La molitura desiderata del buffer è la somma di [Acido] + [Base].
Per un buffer di 1 M, [Base] + [Acido] = 1 e [Base] = 1 - [Acido]
Sostituendolo nell'equazione di rapporto, a partire dal punto 2, [Acido] = 0. 6712 mol / L
Soluzione per [Acido]
Utilizzando l'equazione: [Base] = 1 - [Acido], è possibile calcolare:
[Base] = 0 3288 mol / L
3. Mescolare la base di acido e coniugato
Dopo aver utilizzato l'equazione di Henderson-Hasselbalch per calcolare quale rapporto acido-base è necessario per il tampone, preparare appena meno di 1 litro di soluzione utilizzando le quantità corrette di fosfato monosodico e fosfato di sodio .
4. Controllare il pH
Utilizzare una sonda pH per confermare il raggiungimento del pH corretto del tampone. Regolare leggermente se necessario utilizzando acido fosforico o idrossido di sodio (NaOH).
5. Correggere il Volume
Una volta raggiunto il pH desiderato, portare il volume del tampone a 1 litro. Quindi diluisci il tampone come desiderato. Questo stesso buffer può essere diluito per creare buffer di 0. 5 M, 0. 1 M, 0. 05 M o qualsiasi cosa in mezzo.
6. Suggerimenti per il buffer
Ricorda che pKa non è facilmente misurato ad un valore esatto.Valori leggermente diversi potrebbero essere disponibili in letteratura da diverse fonti.
7. Cosa avete bisogno
Per fare il buffer, avrete bisogno di tre sostanze, mentre i restanti materiali sono attrezzature. Le sostanze sono il fosfato monosodico, il fosfato di sodio e l'acido fosforico o l'idrossido di sodio per regolare il pH.
Avrete anche bisogno di un misuratore di pH e una sonda e un opportuno laboratorio. Ciò comprende un pallone volumetrico, cilindri graduati, bicchieri e barre di stiratura.
Infine, hai bisogno di una piastra di cottura agitata.
Come fare un tampone TAE in pochi passi
Utilizzare queste istruzioni rapide e semplici mentre si lavora e lavora soluzioni di TAE (Tris-acetato-EDTA) per elettroforesi a gel.
Come fare un semplice rollover IRA senza pagare tasse
Nonostante il suo nome, IRAs semplici non sempre fare semplici rollover IRA. Ecco cosa c'è da sapere sul rollover SIMPLE IRA.
Cosa è un test sulla tampone della bocca?
Un test di droga sulla tampone della bocca è un test medico comune fatto dai datori di lavoro. Leggete qui per informazioni su cosa sia, chi dia prova di droga orale e quando.